ICS 65.120 B 46 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 8381.4—2005 配合饲料中T-2毒素的测定 薄层色谱法 Method for determination of T-2 toxin in formula feed- Thin layer chromatography 2005-09-05发布 2006-02-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 8381.4—2005 前言 本标准参考了GB/T14933一1994《小麦中T-2毒素的酶联免疫吸附测定方法》。 本标准与GB/T14933—1994的主要差异如下： 将GB/T14933—1994中5.2.2.1的活性炭用量的表述"加人0.4g活性炭”修改为“加人0.5g 活性炭”。这是为了减少流出液中夹带的干扰性杂质； 将GB/T14926.5—1994中酶联免疫吸附测定改为薄层色谱测定； 修改了其中不符合GB/T20001.4一2001《标准编写规则 第4部分：化学分析方法》之处 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准由农业部饲料质量监督检验测试中心（沈阳)负责起草，吉林省兽药监察所和国家饲料质量 监督检验中心（北京)参加起草。 本标准主要起草人：陈莹莹、曹东、董永亮、战石、李雪兰、李广生、刘同民、杨曙明。 I GB/T 8381.4—2005 配合饲料中T-2毒素的测定 薄层色谱法 1范围 本标准规定了测定配合饲料中T-2毒素的薄层色谱方法。 本标准适用于配合饲料中T-2毒素的测定。 本方法的检出限为1mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T14699.1饲料采样 3原理 配合饲料中的T-2毒素经提取、净化、浓缩和硅胶G薄层板展开后，用20%硫酸乙醇喷布，加热薄 层板，使T-2毒素在365nm紫外光灯下显蓝色荧光，根据其在薄层板上显示荧光的最低检出量来测定 含量。 4试剂 4.1T-2毒素标准品，SIGMAT-48871。 4.2无水乙醇 4.3 石油醚，沸程60℃~90℃、30℃～60℃。 4.4 乙酸乙酯。 4.5丙酮。 4. 6 硅胶G，薄层层析用。 4.7 三氯甲烷-无水乙醇，8十2。 甲醇-水，4十1。 4.8 4. 9 甲醇-丙酮1+2。 4.10 羧甲基纤维素钠溶液，0.5%。 4. 11 苯-乙醚，1十1。 4. 12 甲苯-乙酸乙酯-甲酸，6+3十1。 4. 13 3硫酸乙醇溶液，取市售硫酸20mL，用乙醇稀释至100mL。 4.14 中性氧化铝，层析用，经300℃活化4h，置干燥器中备用。 4. 15 活性炭：取20g活性炭，用27%（体积分数）盐酸溶液浸泡过夜、抽滤后，用热蒸馏水洗至无氯离 1）T-4887是美国Sigma公司的商品代号。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。 如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 1