ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.23—2001 代替GB/T14926.23—1994 实验动物 仙台病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of Sendai virus (SV) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 GB/T 14926. 23—2001 前 創言 本标准是对GB/T14926.23—1994《实验动物 仙台病毒检验方法》的修订，增加了检测病毒抗体 的免疫荧光试验方法。 本标准出中华人民共和国科学技术部提出并归口 本标准起草单位：中国实验动物学会。 本标准主要起节人：贺争鸣。 本标准于1994年1月首次发布。 I 中华人民共和国国家标准 实验动物 CB/T 14926.23—2001 仙台病毒检测方法 代替 GB/T 11926.23—1994 Laboratary animal-Method far examination of Sendai virus (SV) 1范围 本标准规定了仙台病毒(SV)的检测方法、试剂等。 本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠，地鼠、兔仙台病毒的检测。 2 引用标准 下列标雅所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标雅出版时.所示版本均 为有效。所有标推都会被修订，使用本标准的各方成探讨使用下列标推最新版本的可能性。 GB/T11926.502001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T14926.51—2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52—2001实验动物免疫荧光试验 GB/T14926.54—2001实验动物血凝抑制试验 3原理 根据免疫学原理，采用SV抗原检测小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、免血清中仙台病毒抗体;或根据 SV在 定的条件下，能凝集鸡，豚鼠红细胞·这种凝集红细胞的能力可被特兄性抗体所抑制的原理，检测小 鼠、人鼠、豚鼠、地鼠、兔血清巾仙台病毒抗体。 4主要试剂和器材 4.1试剂： 4.1.1 ELISA 抗原 4. 1. 1. 1特只性抗原 而SV感染 9d 龄 SPF鸡胚尿囊腔,培养丁36℃温箱,72 h 后收冻丁1℃，次Ⅱ无菌收取尿囊液， 42 000 r/min 离心 10 min,用 0. 5%鸡或豚鼠红细胞和 SV 阳性血清做血凝和血凝抑制试验,验证其 病毒特异性和血凝效价。上清液再经超速离心浓缩后制成FI.ISA抗原。 4.1.1.2正常抗原 9 d 龄 SPF 鸡胚尿囊液, 4.1.2抗原片 SV 感染 BHK21 细胞,接种后 2～3 d.病变达++～++十时用胰酶消化分散.PBS 洗.涂片。室 温干燥后.冷丙酮固定10 imin，一20℃保存， 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 1