ICS 65.020.30 B 44 GE 中华人民共和国国家标准 GB/T 14927.2—2008 代替GB/T14927.2—2001 实验动物 近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法 Laboratory animal- Immunological marker of inbred mice and rats 2008-12-10发布 2009-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T14927.2—2008 前言 GB/T14927共分2个部分： 第1部分为《实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测法》； 第2部分为《实验动物近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法》。 本部分为GB/T14927的第2部分。 本部分自实施之日起，代替GB/T14927.2一2001《实验动物 近交系小鼠、天鼠皮肤移植检测 法》。 本部分与GB/T14927.2—2001相比主要技术差异如下： a） 修订实验动物近交系小鼠、大鼠皮肤移植法部分内容； b）增加小鼠H-2单倍型微量细胞毒检测法； c） 本部分名称修改为“实验动物 近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法”。 本部分附录A为资料性附录。 本部分由全国实验动物标准化技术委员会提出并归口。 本部分由全国实验动物标准化技术委员会负责起草。 本部分主要起草人：邢瑞昌、刘双环、马丽颖、岳秉飞、鲍世民 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T14927.2—1994,GB/T 14927.2 2001。 1 GB/T14927.2—2008 实验动物 近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法 1范围 GB/T14927的本部分规定了近交系小鼠、大鼠皮肤移植术法和近交系小鼠H-2单倍型（Haplo- type)检测方法。 本部分近交系小鼠、大鼠皮肤移植术法适用于近交系小鼠和大鼠在培育过程中遗传纯度的检查以 及近交系小鼠和大鼠在繁殖饲养过程中的遗传监测。近交系小鼠H-2单倍型（Haplotype）检测方法适 用于近交系小鼠培育和繁殖饲养过程中的遗传监测，主要检测H-2复合体D区和K区的抗原分型。 2近交系小鼠和大鼠皮肤移植术法 2.1技术原理 移植物在同一近交系中可以被互相接受，即同系移植（isograft)是成功的。 移植物在不同近交系中互相排斥，亦即同种移植（allograft）是不成功的。 F1代动物可以接受任何一个双亲的组织移植物，双亲则不能接受F1代的移植物。 F1代动物可以接受F2代以后各代动物的移植物 亲本品系可以接受某些F2代以后各代动物的移植物，但是绝大部分被排斥。 本部分采用背部皮肤移植法和尾部皮肤移植法。两种方法原理相同，并具有同等标准效力。 2.2背部皮肤移植法 2.2.1设备和材料 2.2.1.1固定板(18cmX12cm)。 2.2.1.2戊巴比妥钠（医用）。 2.2.1.3医用橡皮膏。 2.2.1.4医用凡士林。 2.2.1.5 粉剂青霉素G钠（80万U，人或兽用）。 2. 2. 1. 6 3%碘酒棉球。 2. 2. 1.7 75%酒精棉球。 2.2. 1.8 眼科剪刀。 2. 2. 1. 9 眼科镊子。 2.2.1.10 一次性注射器（1mL） 2. 2. 1. 11 霉素G钠)。 2.2.1.12 脱脂棉做成的棉球 2.2.1.13 将手术器材置于高压锅内121℃、40min高压灭菌。 2.2.2操作步骤 2.2.2.1随机取同性别4周龄～8周龄的动物10只，动物可来自基础群或血缘扩大群 2.2.2.2每只动物分别编号并称取体重，详细记录品系名称、性别、出生年月日、谱系及其他特征。 2.2.2.3用无菌生理盐水配制0.7%戊巴比妥钠溶液。 2.2.2.4采用腹腔注射0.7%戊巴比妥钠溶液麻醉动物。小鼠每10g体重注射0.1mL，大鼠每20g 1 SZIG