ICS 67.040 C 53 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T5009.108—2003 代替GB/T14931.2—1994 畜禽肉中己烯雌酚的测定 Determination of diaethylstilbestrol in flesh 2004-01-01实施 2003-08-11发布 中华人民共和国卫生部 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T5009.108—2003 前言 本标准代替GB/T14931.2一1994《畜禽肉中已烯雌酚的测定方法》。 本标准与GB/T14931.2一1994相比主要修改如下： 修改了标准的中文名称，标准中文名称改为《畜禽肉中已烯雌酚的测定》； 按照GB/T20001.4一2001《标准编写规则第4部分：化学分析方法》对原标准的结构进行了 修改。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准负责起草单位：辽宁省食品卫生监督检验所、沈阳市卫生防疫站、鞍山市卫生防疫站。 本标准主要起草人：翟永信、李学明、冯昕、吴百禄、刘春艳。 原标准1994年首次发布，本次为第一次修订。 1 GB/T5009.108—2003 畜禽肉中己烯雌酚的测定 1范围 本标准规定了用高效液相色谱（HPLC)方法测定畜禽肉中己烯雌酚残留。 本标准适用于新鲜鸡肉、牛肉、猪肉、羊肉中已烯雌酚残留量测定。检出限0.25mg/kg。 2原理 试样匀浆后，经甲醇提取过滤，注人HPLC柱中，经紫外检测器鉴定。于波长230nm处测定吸光 度，同条件下绘制工作曲线，已烯雌酚含量与吸光度值在一定浓度范围内成正比，试样与工作曲线比较 定量。 3试剂 3.1甲醇 3.20.043mol/L磷酸二氢钠（NaH,PO·2H,O)取1g磷酸二氢钠溶于水成500mL。 SAG 3.3磷酸 3.4己烯雌酚（DES)标准溶液：精密称取100mg已烯雌酚（DES）溶于甲醇，移人100mL容量瓶中， 加甲醇至刻度，混匀，每毫升含DES1.0mg，贮于冰箱中。 3.5已烯雌酚（DES)标准使用液：吸取10.00mLDES贮备液，移人100mL容量瓶中，加甲醇至刻度， 混匀，每毫升含DES100μg。 4仪器 4.1 高效液相色谱仪：具紫外检测器。 4.2小型绞肉机。 4.3小型粉碎机。 4.4电动振荡机。 4.5离心机。 5分析步骤 5.1提取及净化 称取5g（士0.1g）绞碎（小于5mm）肉试样，放人50mL具塞离心管中，加10.00mL甲醇，充分搅 拌，振荡20min，于3000r/min离心10min，将上清液移出，残渣中再加10.00mL甲醇，混匀后振荡 20min，于3000r/min离心10min，合并上清液，此时若出现混浊，需再离心10min，取上清液过 0.5μmFH滤膜，备用。 5.2色谱条件 5.2.1紫外检测器：检测波长230nm。 5.2.2灵敏度：0.04AUFS 5.2.3流动相：甲醇+0.043mol/L磷酸二氢钠（70十30）用磷酸调pH=5（其中NaH,PO4·2H2O 水溶液需过0.45μm滤膜）。 5.2.4流速：1mL/min。 5.2.5进样量：20μL。 1