ICS 65.120 B 46 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2297--2012 饲料中苯甲酸和山梨酸的测定 高效液相色谱法 Determination of benzoic acid and sorbic acid in feeds- High performance liquid chromatography 行业标准信息服务平台 2013-03-01实施 2012-12-24 发布 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 2297-2012 前 言 本标准按照GB/T1.1给出的规则起草。 本标准由农业部畜牧业司提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)归口。 本标准起草单位：农业部饲料质量监督检验测试中心（成都）。 本标准主要起草人：张静、魏敏、王宇萍、赵立军、林顺全、高庆军、冯娅、陈红、程传民 行业标准信息服务平台 1 NY/T 2297—2012 饲料中苯甲酸和山梨酸的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了饲料中苯甲酸和山梨酸的高效液相色谱测定方法。 本标准的检测限：苯甲酸和山梨酸均为20mg/kg。 本标准的定量限：苯甲酸和山梨酸均为50mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3原理 饲料中的苯甲酸和山梨酸经提取液提取、离心后，取部分上清液经混合型阴离子固相萃取柱净化， 用高效液相色谱仪一紫外检测器检测，外标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，色谱分析用水符合GB/T6682中二级水的规定， 4.1甲醇：色谱纯。 4.2甲酸：色谱纯。 4.3氨水。 4.4亚铁氰化钾溶液(0.25mol/L)：称取亚铁氰化钾[K,Fe(CN)。·3H2O]10.6g,加水溶解并稀释至 100 mL。 4.5乙酸锌溶液（1.0mol/L）：称取乙酸锌[Zn(CH:COO)2·2H2O)22g，加人冰乙酸3mL，加水稀释 至100mL。 4.6磷酸盐缓冲液（pH=6.7)：分别称取磷酸二氢钾（KH,PO4）2.5g和磷酸氢二钾（K,HPO4· 3H,0)2.5g,用水溶解后定容至1000mL。米 4.72%氨水溶液：量取氨水2mL，加水至100mL，混匀。 4.85%甲酸甲醇溶液：量取甲酸5mL，加甲醇至100mL,混匀。 4.9流动相：量取磷酸盐缓冲液（4.6)900mL，加人甲醇100mL，混匀。 4.10苯甲酸对照品：CH.O2，纯度≥98%。 4.11山梨酸对照品：C.HO2，纯度≥98% 4.12标准溶液的配制 4.12.1标准溶液贮备液：准确称取适量苯甲酸和山梨酸对照品各50.0mg，用甲醇溶解并定容至 1