ICS 65.020.01 B 16 中华人民共和国国家标准 GB/T35337—2017 葡萄黄点类病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Grapevine yellow speckle viroid 2017-12-29发布 2018-07-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T35337—2017 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271)提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中国农业科 学院植物保护研究所。 本标准主要起草人：张永江、邓丛良、骆卫峰、赵晓丽、吕玉峰、张志想、辛言言。 GB/T 35337—2017 葡萄黄点类病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了葡萄黄点类病毒的检疫鉴定方法 本标准适用于可能带有葡萄黄点类病毒的葡萄繁殖材料的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3 3葡萄黄点类病毒基本信息 学名:Grapevine yellow speckle viroid 。 缩写：GYSVd。 异名：葡萄黄斑类病毒、葡萄黄痘类病毒。 分类地位：马铃薯纺锤块茎类病毒科（Pospiviroidae）、苹果锈果类病毒属（Apscaviroid）。 葡萄黄点类病毒的其他信息参见附录A。 4方法原理 类病毒检测主要针对其核酸序列。主要的方法有RT-PCR和核酸分子杂交。 5仪器设备、主要用具和主要试剂 5.1仪器设备 电子天平（感量0.001g）、普通天平（感量0.1g）、高速冷冻离心机、小型瞬时离心机、普通冰箱、超 低温冰箱（一80℃）、制冰机、涡旋振荡器、磁力搅拌器、高压灭菌锅、pH计、PCR仪、微波炉、电泳仪、电 浴锅、组织破碎仪等。 5.2 2主要用具 可调移液器（2.5μL、10μL、20μ、200μL、1000μL、5000μL）、无RNA酶吸头（10μL、20μL 200μL、1000μL、5000μL）、无RNase离心管（1.5mL、5mL、10mL）、研钵、研棒、磁性分离架、PCR 反应管（200μL）、实时荧光96孔反应板、杂交瓶、杂交膜、杂交袋、X光片。 5.3主要试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中相关规定。普通RT-PCR检 1