ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 22812012 苹果病毒检测技术规范 Protocol for the detection of apple viruses 行业标准信息服务 2012-12-24 发布 2013-03-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 2281—2012 前言 本标准按照GB/T1.1给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国果品标准化技术委员会（SAC/TC510)归口。 本标准起草单位：中国农业科学院果树研究所、农业部果品及苗木质量监督检验测试中心（兴城）。 本标准主要起草人：董雅凤、张尊平、范旭东、任芳、聂继云。 行业标准信息服务平台 I NY/T 2281—2012 苹果病毒检测技术规范 1范围 本标准规定了苹果病毒检测的抽样与取样要求、检测方法、判定原则。 本标准适用于苹果无病毒母本树、无病毒苗木及苹果植株的苹果花叶病毒（Applemosaic irus， ApMV）、苹果褪绿叶斑病毒（Applechlorotic leafspotvirus，ACLSV）、苹果茎痘病毒（Apple stem pit ting virus ASPV)、苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)、苹果锈果类病毒(Apple scar skin viroid,ASSVd)的检测。 2抽样与制样 2.1抽样 2.1.1无病毒母本树 每株均需检测。 2. 1.2无病毒苗木 分品种进行抽样。采取随机抽样方法。以666.7m²抽检10株为基数，每增加666.7m²，增检5 株，不足666.7m²的按666.7m²计。 2.1.3苹果植株 对疑似感病的植株每株必检。 2.2制样 2.2.1木本指示植物检测 温室检测时，早春从待检的苹果植株上取一年生芽嫁接到特定指示植物上。田间检测时，夏末秋初 取待检植株离皮绿枝进行芽接。 2. 2. 2ELISA 和 RT-PCR 检测 春季取待检苹果植株上幼嫩新鲜叶片；或冬季取休眠枝条的韧皮部组织。 3检测方法 3.1田间症状观察法 检测对象为苹果锈果类病毒和苹果花叶病毒，田间直接观察其症状表现（参见附录A）。 3.2木本指示植物检测法 包括温室检测和田间检测。 检测对象为苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒、苹果茎沟病毒、苹果花叶病毒和苹果锈果类病毒，具 体操作参见附录B。 3.3酶联免疫吸附法(ELISA) 检测对象为苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒、苹果茎沟病毒和苹果花叶病毒，具体操作参见附录 C. 3.4反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 检测对象为苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒、苹果茎沟病毒、苹果花叶病毒和苹果锈果类病毒，具 体操作参见附录D。 1