SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1586.22008 菜豆晕疫病菌检疫鉴定方法 Identification of Pseudomonas savastanoi pv. phaseolicola(Burkholder)Gardan et al. 行业标准信息服务平台 2008-09-04发布 2009-03-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1586.2—2008 前 言 本部分的附录B和附录C为规范性附录，附录A为资料性附录 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。 本部分主要起草人：刘鹏、崔铁军、廖芳、刘跃庭、冯洁、王金成。 本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T1586.2—2008 菜豆晕疫病菌检疫鉴定方法 1范围 SN/T1586的本部分规定了进出境植物检疫中菜豆晕疫病菌（Pseudomonassavastanoipv.phase olicola)的检疫鉴定方法。 本部分适用于进出境菜豆（Phaseolusuulgaris）、大豆（Glycinemaa）等的植物种子中菜豆晕疫病 菌的检疫和鉴定。 2原理 2.1病菌分类地位和重要特征 菜豆晕疫病（Haloblightof beans)是菜豆、大豆等豆科植物上的严重病害，该病的病原菌为菜豆晕 疫病菌（Pseudomonassavastanoipv.phaseolicola）。菜豆晕疫病菌属原核生物界（Procaryotes），薄壁 菌门（Gracilicutes），假单胞菌科（Pseudomonaceae），假单胞菌属（Pseudomonas）；单胞，杆状，直或微弯， 革兰氏阴性，极鞭单生或多生，能运动，无鞘，无孢子，一般天小（0.5um～1.0um）×（0.4um～ 1.5um），代谢呼吸型，化能有机营养型，接触酶阳性，精氨酸双水解酶阴性，氧化酶阴性。相关资料参 见附录A。 2.2鉴定原理 菜豆晕疫病菌的形态特征、生物学特性、生化特性、寄主范围、传播途径，以及分子生物学特征作为 制定本检疫鉴定标准的依据。 3仪器、用具 生物显微镜； 生物安全柜（或超净工作台）； 高压灭菌器： 业标准信息服务 一小型电动粉碎机； 恒温培养箱； 离心机； PCR仪； —电泳设备； 凝胶成像系统； 一其他常规实验室设备、器具及试剂。 4主要试剂 除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂和去离子水。PCR反应体系用水双蒸水。其他试剂比 如各种溶液、缓冲液和培养基都是检测方法特有的，都应按附录要求准备。商品化试剂参见其使用 说明。 双氧水（3%），蛋白陈，酵母粉，硫酸镁（MgSO·7H,O），蔗糖（C12H22On），磷酸氢二钾 （K,HPO,），琼脂，多聚蛋白陈，甘油，乙二胺四乙酸（EDTA），三羟甲基氨基甲烷（Tris），盐酸，冰乙酸， 磷酸二氢钾（KH,PO），磷酸氢二钠（NaH,PO），琼脂糖，漠化乙锭，TagDNA聚合酶，10XPCR缓冲 液，dNTP（2.5mmol/Leach），溴酚蓝，二甲苯青FF,2000bpMarker。 1