ICS 65.020 CCS B 16 湖 DB43 南 省 地 方 标 准 DB43/T 1 95 1—2020 土壤中噁唑酰草胺的测定-高效液相色谱法 Determination of metamifop in siol - High performance liquid charomatographic method 2020-12-29发布 湖南省市场监督管理局 2021-03-29实施 发 布 DB43/T 1951—2020 目 次 前言························································································································ Ⅲ 1 范围 ····················································································································· 1 2 规范性引用文件 ······································································································ 1 3 术语和定义 ············································································································ 1 4 试剂与材料 ············································································································ 1 5 仪器与设备 ············································································································ 2 6 采样与试样的制备 ··································································································· 2 7 测定步骤 ··············································································································· 2 8 结果计算 ··············································································································· 3 9 灵敏度、准确度和精密度 ·························································································· 3 附录 A（资料性） 噁唑酰草胺高效液相色谱图 ································································· 4 附录 B（资料性） 噁唑酰草胺高效液相色谱检测结果记录表 ··············································· 5 I DB43/T 1951—2020 II DB43/T 1951—2020 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由湖南省农业农村厅提出。 本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：湖南省植物保护研究所。 本文件主要起草人：罗香文、刘勇、张德咏、陈昂、陈武瑛、李宗云、张卓、张宇。 III DB43/T 1951—2020 IV DB43/T 1951—2020 土壤中噁唑酰草胺的测定-高效液相色谱法 1 范围 本文件规定了土壤中噁唑酰草胺的高效液相色谱法测定的术语与定义、试剂与材料、仪器与设备、 采样与试样的制备、测定步骤、结果计算和灵敏度、准确度和精密度的要求。 本文件适用于土壤中噁唑酰草胺的高效液相色谱法测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 NY/T 1121.1 土壤检测 第 1 部分：土壤样品的采集、处理和贮存 NY/T 395—2012 农田土壤环境质量检测技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 外标法定量 用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法。 工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线，求出斜率、截距。在完全相同的 条件下，准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液，根据待测组分的信号，从标准曲线上查出其浓度， 或用回归方程计算。 4 试剂与材料 除另有规定外，所有实验用试剂均为分析纯；实验用水为超纯水，规格符合 GB/T 6682 的相关规定。 4.1 乙腈，色谱纯。 4.2 氯化钠，分析纯。 4.3 噁唑酰草胺标准品，噁唑酰草胺标准品（90％） ，4 ℃避光保存。 4.4 标准储备液：准确称取 90％噁唑酰草胺标准品 0.0111 g（精确到 0.001 g）于 10 mL 容量瓶中， 用乙腈溶解并定容，配制成 1000 mg/L 的噁唑酰草胺标准储备液，4 ℃避光保存。 4.5 标准工作液：移取适量噁唑酰草胺标准储备液，用乙腈稀释成 0.05 mg/L-5 mg/L 的噁唑酰草胺标 准工作液，现配现用。 4.6 微孔滤膜：0.22 µm，有机膜。 1 DB43/T 1951—2020 5 仪器与设备 5.1 高效液相色谱：配有紫外检测器。 5.2 分析天平：感量 0.0001 g 和 0.001 g。 5.3 旋转蒸发仪。 5.4 超声波清洗机。 6 采样与试样的制备 6.1 采样按照 NY/T 1121.1 的规定执行。 6.2 土壤试样制备按照 NY/T 1121.1 的规定执行。 7 测定步骤 7.1 提取与净化 准确称取 6.2 制备的土壤试样 20 g（精确到 0.01 g）于 100 mL 的离心管中，加入 40.0 mL 乙腈涡 旋提取 1 min，再加入 7 g 氯化钠，涡旋 1 min 后离心 5 min (4000 r/min)，取 8 mL 上清液于旋蒸瓶 中，于旋转蒸发仪上蒸至近干，用乙腈定容至 2 mL，取约 1 mL 定容液过 0.22 µm 的微孔滤膜，待测。 7.2 测定 7.2.1 高效液相色谱参数 ——色谱柱：C18 柱 （4.6 ×150 mm，5.0 µm），或相当者； ——流动相：乙腈：水（V/V=75：25） ； ——流速：1.0 mL/min； ——进样量：10 µL； ——检测波长：237 nm； ——柱温：30 ℃。 7.2.2 试样测定 7.2.2.1 取试样溶液和相应的标准工作液进样，以组分的保留时间定性，以色谱峰面积积分值做单点 或多点校准，外标法定量。 7.2.2.2 标准工作液和试样溶液中噁唑酰草胺的响应值在仪器检测的线性范围内。 7.2.2.3 噁唑酰草胺高效液相色谱图参考附录 A，检测结果记录表（表 1）参考附录 B。 7.2.3 空白试验 除不加噁唑酰草胺标准品外，采用上述相同步骤操作。 8 结果计算 试样中噁唑酰草胺的含量以质量分数ω计，单位以毫克每千克（mg/kg）表示，按公式（1）计算： 2 DB43/T 1951—2020 ω = ρ× A As × V1 V2 × V3 m ……………………………………………………（1） 式中： 9 ρ ——标准溶液中噁唑酰草胺的质量浓度（mg/L） ； V1 ——提取溶剂总体积（mL） ； V2 ——用于进样检测的分取体积（mL） ； V3 ——试样溶液定容体积（mL） ； A ——试样溶液中噁唑酰草胺的峰面积（AU•S） ； As ——标准溶液中噁唑酰草胺的峰面积（AU•S） ； m ——试样的质量（g） 。 灵敏度、准确度和精密度 9.1 灵敏度 噁唑酰草胺在土壤中的最低定量限为 4.00×10 -2 µg/kg。 9.2 准确度 本方法噁唑酰草胺在 0.05 mg/kg、0.5 mg/kg、5 mg/kg 添加浓度水平上的回收率范围为 87.40％～ 92.30％。 9.3 精密度 本方法的批内变异系数≤5％，批间变异系数≤10％。 3 DB43/T 1951—2020 附 录 A （资料性） 噁唑酰草胺高效液相色谱图 图 A 噁唑酰草胺高效液相色谱图 注 1：左，0.5 mg/kg 噁唑酰草胺标准液； 注 2：右，土壤中添加 1 mg/kg 噁唑酰草胺标准物质； 4 DB43/T 1951—2020 附 录 B （资料性） 噁唑酰草胺高效液相色谱检测结果记录表 表 1 噁唑酰草胺高效液相色谱检测结果记录表 样本标号 检测时间 检测峰面积 噁唑酰草胺浓度（µg/kg） 检测人 5