ICS 67.060 B 22 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T2639—2014 稻米直链淀粉的测定 分光光度法 Determination of amylose content in rice-Spectrophotometry method 行业标准信息服务平台 2014-10-17发布 2015-01-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 2639—2014 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。 本标准起草单位：中国水稻研究所、农业部稻米及制品质量监督检验测试中心。 本标准主要起草人：段彬伍、孙成效、朱智伟、陈能、方长云、何小嫣、于永红、卢林。 行业标准信息服务平台 H NY/T 2639-2014 稻米直链淀粉的测定 分光光度法 1范围 本标准规定了稻米直链淀粉的分光光度测定方法 本标准适用于稻米直链淀粉的测定，不适用于熟化稻米直链淀粉的测定。 2规范性引用文件 下列文件对本文件的引用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T15683大米直链淀粉含量的测定 3原理 稻米淀粉与碘形成显色复合物，在波长620nm处测定显色复合物的吸光度值，其吸光度值与直链 淀粉含量成正比。 4试剂 除非另有规定，仅使用分析纯试剂，水为GB/T6682中规定的三级水。 4.1试剂 4.1.1 乙醇(CH;CH,OH):95%。 4. 1.2 冰乙酸(CH,COOH)。 4. 1.3柠檬酸(C,HgO,·2HzO)。 4.1.4氢氧化钠(NaOH)。 4. 1.5 碘(12)。 4.1.6碘化钾(KI)。 4.1.7氢氧化钠溶液[c(NaOH)=1mol/L7:称取40.0g氢氧化钠(NaOH)溶于1000mL水中，混匀。 4.1.8氢氧化钠工作液[c(NaOH)=0.005mol/L]:吸取5.0mL氢氧化钠溶液（4.1.7)，定容至1000 mL，临用前配制。 4. 1. 9 乙酸溶液[c(CH;COOH)=1 mol/L]:量取 57.8mL冰乙酸(CH:COOH),定容至1 000mL。 4.1.10碘液：称取2.000士0.005g碘（I2）和20.000±0.001g碘化钾（KD用少量水溶解，定容至1000 mL，避光保存。 4.1.11碘工作液：吸取12.5mL碘液（4.1.10）于250mL容量瓶中，加人5.0mL乙酸溶液（4.1.9）， 定容。临用前配制。 4.1.12柠檬酸溶液：称取5.6g柠檬酸（CgHO,·2H2O)，用水溶解，加入5.0mL冰乙酸 (CHsCOOH)，定容至1000mL。 4.2直链淀粉参比样：糯米及具高、中、低直链淀粉含量的大米参比样品各一个（其直链淀粉含量预先 经GB/T15683中的方法准确测定）。 1 NY/T 2639—2014 5仪器 5.1分光光度计或流动注射仪。 5.2分析天平，感量±0.0001g。 5.3实验室用粉碎机，可将大米粉碎，并过0.25mm筛。 5.4水浴锅。 5.550mL容量瓶。 6分析步骤 6.1试样制备 稻谷试样需先行脱壳并踞磨成精米。将精米试样混匀，分取约10g试样，粉碎并过0.25mm筛，装 入纸袋。将其与直链淀粉参比样（4.2)在相同的条件下放置2d，以平衡水分。 6.2试液制备 润分散，再沿颈壁加入4.5ml.氢氧化钠溶液（4.1.7），轻轻摇匀，随后将其置于沸水浴中煮沸10min，取 出，冷却至室温，以水定容。作为直链淀粉参比样溶液及试料待测液，备用。 6.3空白溶液制备 6.4测定 6.4.1分光光度计测定 6.4.1.1标准曲线的制作：分别吸取糯米，具低、中、高直链淀粉含量的参比样溶液和空白溶液（6.3） 以水定容，静置10min，待测。分光光度计以空白溶液调零，在波长620nm处测定参比标准溶液的吸光 度值。以吸光度值为纵坐标，直链淀粉含量为横坐标，绘制标准曲线。直链淀粉含量以精米干基质量分 数表示。 6.4.1.2试液测定：吸取待测液2.50mL于50mL容量瓶中，加水约25mL，再加入0.5mL乙酸溶液 （4.1.9）和1.0mL碘液（4.1.10），以水定容，静置10min后，在波长620nm处测定溶液的吸光度值 6.4.2流动注射分析仪测定 打开流动注射分析仪，预热稳定。按照说明书调整仪器至正常工作状态，测定波长设为620nm。 按仪器规定调整泵速，清洗管路10min～20min。按标识将管线分别接人氢氧化钠工作液（4.1.8）、碘 工作液（4.1.11）和柠檬酸溶液（4.1.12）中。按照仪器要求编制样品表，将直链淀粉标准溶液及样品溶 液依序放入进样架。待基线稳定后测定。 7结果表示 将测得试样溶液的吸光度值代人标准曲线方程得到测试结果。直链淀粉含量以干基质量分数表 示。以2次平行测定的算术平均值表示测定结果，小数点后保留一位。 8精密度 当样品含量>10%时，在重现性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于1.0%。当样 品含量=10%时，在重现性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于0.5%。 2 NY/T 2639—2014 5仪器 5.1分光光度计或流动注射仪。 5.2分析天平，感量±0.0001g。 5.3实验室用粉碎机，可将大米粉碎，并过0.25mm筛。 5.4水浴锅。 5.550mL容量瓶。 6分析步骤 6.1试样制备 稻谷试样需先行脱壳并踞磨成精米。将精米试样混匀，分取约10g试样，粉碎并过0.25mm筛，装 入纸袋。将其与直链淀粉参比样（4.2)在相同的条件下放置2d，以平衡水分。 6.2试液制备 润分散，再沿颈壁加入4.5ml.氢氧化钠溶液（4.1.7），轻轻摇匀，随后将其置于沸水浴中煮沸10min，取 出，冷却至室温，以水定容。作为直链淀粉参比样溶液及试料待测液，备用。 6.3空白溶液制备 6.4测定 6.4.1分光光度计测定 6.4.1.1标准曲线的制作：分别吸取糯米，具低、中、高直链淀粉含量的参比样溶液和空白溶液（6.3） 以水定容，静置10min，待测。分光光度计以空白溶液调零，在波长620nm处测定参比标准溶液的吸光 度值。以吸光度值为纵坐标，直链淀粉含量为横坐标，绘制标准曲线。直链淀粉含量以精米干基质量分 数表示。 6.4.1.2试液测定：吸取待测液2.50mL于50mL容量瓶中，加水约25mL，再加入0.5mL乙酸溶液 （4.1.9）和1.0mL碘液（4.1.10），以水定容，静置10min后，在波长620nm处测定溶液的吸光度值 6.4.2流动注射分析仪测定 打开流动注射分析仪，预热稳定。按照说明书调整仪器至正常工作状态，测定波长设为620nm。 按仪器规定调整泵速，清洗管路10min～20min。按标识将管线分别接人氢氧化钠工作液（4.1.8）、碘 工作液（4.1.11）和柠檬酸溶液（4.1.12）中。按照仪器要求编制样品表，将直链淀粉标准溶液及样品溶 液依序放入进样架。待基线稳定后测定。 7结果表示 将测得试样溶液的吸光度值代人标准曲线方程得到测试结果。直链淀粉含量以干基质量分数表 示。以2次平行测定的算术平均值表示测定结果，小数点后保留一位。 8精密度 当样品含量>10%时，在重现性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于1.0%。当样 品含量=10%时，在重现性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于0.5%。 2 NY/T 2639—2014 5仪器 5.1分光光度计或流动注射仪。 5.2分析天平，感量±0.0001g。 5.3实验室用粉碎机，可将大米粉碎，并过0.25mm筛。 5.4水浴锅。 5.550mL容量瓶。 6分析步骤 6.1试样制备 稻谷试样需先行脱壳并踞磨成精米。将精米试样混匀，分取约10g试样，粉碎并过0.25mm筛，装 入纸袋。将其与直链淀粉参比样（4.2)在相同的条件下放置2d，以平衡水分。 6.2试液制备 润分散，再沿颈壁加入4.5ml.氢氧化钠溶液（4.1.7），轻轻摇匀，随后将其置于沸水浴中煮沸10min，取 出，冷却至室温，以水定容。作为直链淀粉参比样溶液及试料待测液，备用。 6.3空白溶液制备 6.4测定 6.4.1分光光度计测定 6.4.1.1标准曲线的制作：分别吸取糯米，具低、中、高直链淀粉含量的参比样溶液和空白溶液（6.3） 以水定容，静置10min，待测。分光光度计以空白溶液调零，在波长620nm处测定参比标准溶液的吸光 度值。以吸光度值为纵坐标，直链淀粉含量为横坐标，绘制标准曲线。直链淀粉含量以精米干基质量分 数表示。 6.4.1.2试液测定：吸取待测液2.50mL于50mL容量瓶中，加水约25mL，再加入0.5mL乙酸溶液 （4.1.9）和1.0mL碘液（4.1.10），以水定容，静置10min后，在波长620nm处测定溶液的吸光度值 6.4.2流动注射分析仪测定 打开流动注射分析仪，预热稳定。按照说明书调整仪器至正常工作状态，测定波长设为620nm。 按仪器规定调整泵速，清洗管路10min～20min。按标识将管线分别接人氢氧化钠工作液（4.1.8）、碘 工作液（4.1.11）和柠檬酸溶液（4.1.12）中。按照仪器要求编制样品表，将直链淀粉标准溶液及样品溶 液依序放入进样架。待基线稳定后测定。 7结果表示 将测得试样溶液的吸光度值代人标准曲线方程得到测试结果。直链淀粉含量以干基质量分数表 示。以2次平行测定的算术平均值表