ICS 65.020.20 B 38 DB45 广 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 DB45/T 1857—2018 岩黄连组培苗生产技术规程 Techinical regulation of tissue culture seedling production on Corydalis saxicola Bunting 2018- 10 - 20 发布 广西壮族自治区质量技术监督局 2018 - 11 - 20 实施 发 布 — DB45/T 1857 2018 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 组培 .............................................................................. 1 4 移栽育苗 .......................................................................... 2 5 出圃 .............................................................................. 3 6 运输 .............................................................................. 3 7 生产档案 .......................................................................... 3 附录 A（规范性附录）培养基配方 ........................................................ 4 I — DB45/T 1857 2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区卫生和计划生育委员会提出。 本标准由广西卫生标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：广西壮族自治区药用植物园。 本标准主要起草人：李翠、李林轩、张占江、郭晓云、韦莹、王一诺。 III — DB45/T 1857 2018 岩黄连组培苗生产技术规程 1 范围 本标准规定了岩黄连（Corydalis saxicola Bunting）组培苗的组培、移栽育苗、出圃、运输和生 产档案等的要求。 本标准适用于广西境内岩黄连组培苗的生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 3095 环境空气质量标准 GB 5084 农田灌溉水质标准 NY/T 393 绿色食品农药使用准则 国家药品监督管理局第 32 号令（2002 年） 中药材生产质量管理规范（试行） 3 组培 3.1 外植体选材 晴天上午9～10时采集为宜。 选择健壮、无病虫危害的岩黄连植株，选取2 cm～3 cm茎尖为外植体。 记录采集号、采集地点、生长环境、采集时间、采集人，建立外植体采集信息档案，记录表见表1。 表1 岩黄连取材记录表 序号 采集号 采集地点 生长环境 采集时间 采集人 备注 3.2 外植体灭菌 3.2.1 材料预处理 用3 %表面去污剂将外植体搅拌1 min、再用棉花擦洗茎尖表面污垢，线状清水冲洗8 min～10 min， 置于超净台上。 3.2.2 灭菌 取岩黄连茎尖为外植体；用75%乙醇浸泡30 s，无菌水冲洗1遍，浸泡在0.1%的HgCl 溶液灭菌8 min～ 12 min（添加2滴吐温-20）、无菌水冲洗3～5次后放于灭菌好的不锈钢碟子上。 2 1 — DB45/T 1857 2018 3.3 接种 在超净台上，切去岩黄连茎尖伤口和灭菌剂接触部分，保留茎尖长1 cm～1.5 cm，茎尖朝上，接种 到诱导培养基中，培养基按附录A中A.1的要求配制，每瓶接种3～5个，拧紧瓶盖，培养30 d～35 d。 3.4 培养条件 光照强度为1 500 lx～1 800 lx，培养温度为23℃～27℃，每天光照时间10 h～12 h。 3.5 诱导培养 在超净台上将已灭菌后的茎尖插入诱导培养基中进行培养, 30 d～35 d接种到增殖培养基，培养基 按附录A中A.2的要求配制。 3.6 增殖培养 将长势良好的无菌苗剪切成1.0 cm～1.5 cm长的不定芽接入继代增殖培养基中培养，10 d～15 d长出 丛生芽，培养30 d～35 d接种到壮苗生根培养基，培养基按附录A中A.3的要求配制。 3.7 生根培养 将增殖培养后叶片展开、生长健壮、高3 cm～5 cm的无根苗剪切成带叶片的芽苗，接入生根培养基 中培养。当苗高≥5 cm时，移至大棚炼苗。 4 移栽育苗 4.1 苗圃地 选择背风向阳、排灌良好的地方为出圃地，配备遮阳网和防虫网。环境空气质量应符合 GB 3095 的规定，灌溉水的使用应符合 GB 5084 的规定。 4.2 移栽基质 pH 5.5～pH 6.5的泥炭土和蛭石，且含量比为1 :1，对基质淋施杀菌剂。 4.3 移栽容器 选择规格为60孔的穴盘为移栽容器。 4.4 炼苗 选择生长健壮的带根瓶苗，在室温为25℃的室内炼苗2 d～3 d后打开瓶盖，在瓶中加入清水，再炼 苗3 d～5 d，开盖后注意喷雾保湿。 4.5 移栽 宜在春季、初夏或秋季，将组培苗洗掉根部培养基，单株栽入穴盘基质中，淋透定根水。 4.6 日常管护 4.6.1 环境控制 温度 18℃～30℃；湿度 60％～80％；透光率为 20％～30％。 2 — DB45/T 1857 2018 4.6.2 水肥管理 生长季节每月施0.1％～0.5％含氮叶面肥1～2次，保持土壤湿润，夏季应多喷叶面肥，保持空气适 度湿度60％～80％。 4.6.3 病虫害防治 按照NY/T 393的要求执行。 5 出圃 苗高≥8 cm，茎杆粗壮、叶色浓绿、根数≥4根，根长≥4 cm，具3 张以上完全叶的植株可出圃，出 圃苗按苗高整齐分装入规格统一、高出苗顶面5 cm 以上的竹筐或塑料筐内，并及时浇透水，贴上有品种 名称、生产日期、生产单位名称及地址的标签。 6 运输 有序叠放，不得过度挤压、随意堆叠；长途运输应有防风、防晒、防雨措施。 7 生产档案 按照国家药品监督管理局第32 号令（2002 年）中第九章的要求执行，并对组培苗生产的各环节进 行记录，记录表见表2。 表2 岩黄连组培苗生产记录表 序号 / 数量 批次 / 株 日期 炼苗 移 栽 施肥 出圃 种类 施用 病虫害防治 浓度 时间 方法 病虫 用药 施用 害种 名称 时间 浓度 负责 施药 人员 方法 类 A 3 — DB45/T 1857 2018 BA 附 录 A （规范性附录） 培养基配方 A.1 诱导培养基 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IAA＋白糖 3％＋琼脂 4.6 g/L，pH 5.8。 A.2 增殖培养基 MS+0.6 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L IAA＋白糖 3%＋琼脂 4.6 g/L，pH 5.8。 A.3 生根培养基 1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA+0.5%活性碳＋白糖 3%＋琼脂 4.6 g/L，pH 5.8。 4 中华人民共和国广西地方标准 岩黄连组培苗生产技术规程 DB45/T 1857―2018 广西壮族自治区质量技术监督局统一印刷 版权专有 侵权必究