ICS 65.020.20 B 38 DB45 广 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 DB 45/T 1855—2018 山风组培苗生产技术规程 The tissue culture procedures of Blumea aromatica 2018 - 10 - 20 发布 广西壮族自治区质量技术监督局 2018 - 11 - 20 实施 发 布 — DB45/T 1855 2018 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 组织培养 .......................................................................... 1 4 移栽和出圃 ........................................................................ 2 5 包装与运输 ........................................................................ 3 6 生产档案 .......................................................................... 4 附录 A（规范性附录）培养基配方 ........................................................ 5 I — DB45/T 1855 2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区卫生和计划生育委员会提出。 本标准由广西卫生标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：广西壮族自治区药用植物园。 本标准主要起草人：谢月英、姚绍嫦、黄宝优、黄雪彦、蓝祖栽、秦双双。 III — DB45/T 1855 2018 山风组培苗生产技术规程 1 范围 本标准规定了山风（Blumea aromatica DC.）组培苗的组织培养、移栽和出圃、包装与运输、生产 档案等的要求。 本标准适用于广西境内山风组培苗的生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 393 绿色食品农药使用准则 DB45/T 532 无公害中药材 产地环境条件 国家药品监督管理局第 32 号令（2002 年） 中药材生产质量管理规范（试行） 3 组织培养 3.1 外植体来源 选择来源清楚、生长健壮、无病虫危害的馥芳艾纳香植株。 3.2 外植体采集 3.2.1 时间 宜在连续晴天2 d以上，于上午9:00～11:00取材。 3.2.2 部位 选取长度为5 cm～10 cm、带顶芽或腋芽的嫩茎。 3.2.3 记录 1。 记录采集号、采集地点、生长环境、采集时间、采集人，建立外植体采集信息档案，采集记录见表 表1 采集记录表 编号： 序号 采集号 采集地点 生长环境 采集时间 采集人 备注 1 — DB45/T 1855 2018 3.3 外植体保存 即采即用。若保存时间超过1 h，用干净湿润的纸或纱布包裹保湿或置于4℃环境下保存。 3.4 外植体灭菌 3.4.1 预处理 将外植体剪成长2 cm～3 cm带腋芽或顶芽的茎段，置于烧杯中，用0.05％洗洁精溶液浸泡10 min， 期间用毛笔轻轻刷洗，流水冲洗15 min灭菌。 3.4.2 灭菌 在超净工作台上，先用75％酒精浸泡外植体5 s～10 s后，无菌水清洗1次；接着用0.1％氯化汞溶液 浸泡并搅拌8 min，无菌水清洗3～4次；再用无菌滤纸吸干表面水分后，将材料切成长0.5 cm、带顶芽或 腋芽的茎段。 3.5 接种 在超净工作台上，将已灭菌并切割好的茎段斜插入诱导培养基中，培养基附录A中A.1的要求配制。 3.6 培养条件 培养条件为（26±2）℃、光照强度2 000 lx～2 500 lx、每天光照时间10 h。 3.7 组培苗培养 3.7.1 初代诱导培养 每瓶诱导培养基接种3～5个外植体。培养7 d～15 d。 3.7.2 继代培养 将初代诱导培养长出的丛生芽分割成含顶芽或腋芽的茎段，转接到增殖培养基中，培养基附录A中 A.2的要求配制。每瓶接种3～5个茎段。继代培养周期20 d。 3.7.3 生根培养 挑选叶片展开、生长健壮、株高2 cm以上的继代苗转接于生根培养基中，培养基附录A中A.3的要求 配制。每瓶接种2～5株，培养15 d后或当根长≥1.0 cm即可开盖炼苗。 4 移栽和出圃 4.1 苗圃地 应符合 DB 45/T 532 的规定。 4.2 移栽基质 移栽前24 h～48 h，选取pH 4.5～6.5的泥炭土、细河沙按3:1比例搅拌均匀后作为基质，用0.5％高锰 酸钾溶液进行消毒。 2 — DB45/T 1855 2018 4.3 移栽容器 宜选择长7 cm×宽10 cm，或长8 cm×宽12 cm营养袋（杯）为移栽用容器。 4.4 移栽炼苗 组培瓶苗移至大棚或室内，常温下炼苗3 d～5 d，然后打开瓶盖继续炼苗2 d～3 d，开盖后应早晚 喷雾保湿。 将 4.5 组培苗移栽 4.5.1 移栽时间 宜在春季、初夏或秋季进行移栽。 4.5.2 洗苗 用清水漂洗干净组培瓶苗根部残留的培养基。 4.5.3 移栽 组培苗移入营养袋（杯）中，压实苗基部基质，淋透定根水，根不外露。 将 4.5.4 移栽后管护 4.5.4.1 温湿度 适宜温度 18℃～28℃，空气相对湿度 85％～90％。晴天时需用遮光度 60％～70％的遮阳网遮阳。 4.5.4.2 施肥 组培苗长出新叶后，每7 d～10 d喷施0.1％～0.5％的尿素1次。遵循先稀后浓，勤施薄施的原则。 4.5.4.3 主要病虫害防治 按照NY/T 393的要求执行，移栽后每7 d～10 d喷施75％百菌清可湿性粉剂1 200倍液或50％多菌灵 可湿性粉剂1 500倍液等杀菌剂1次，共3次。 4.5.4.4 出圃苗质量要求 苗新叶长出5片以上或苗高≥5.0 cm、根系发达、植株完整、无病虫害。 幼 5 包装与运输 5.1 包装 养 （ ）苗装入竹筐或塑料筐内，装运时应有序叠放。外包装上应有清晰、牢固的标识，标 的内 包括生产单位、产地、品种名称、经营许可证编号、数量、包装日期、联系方式等。 将营 袋 杯 识 容 5.2 运输 运输过程应防风、防晒、防雨，运输时间不超过48 h。 3 — DB45/T 1855 2018 6 生产档案 按照国家药品监督管理局第32 号令（2002 年）中第九章的要求执行，并对组培苗生产的各环节进 行记录，记录表见表2。 表2 山风组培苗生产记录表 日期 序号/ 数量 批次 （株） 4 炼 苗 移栽 施肥 出圃 种类 施用 时间 病虫害防治 病虫 浓度 方法 害种 类 用药 施用 名称 时间 浓度 施药 方法 负责 人员 AA — DB45/T 1855 2018 附 录 A （规范性附录） 培养基配方 A.1 诱导培养基配方 MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋白糖 30 g/L＋琼脂 4.5 g/L，pH 6.0。 A.2 继代培养基配方 MS＋6-BA 2.0 mg/L L+KT 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋白糖 30 g/L＋琼脂 4.5 g/L，pH 6.0。 A.3 生根培养基配方 1/2 MS＋NAA 0.3 mg/L ∙L− ＋白糖 30 g/L＋琼脂 4.5 g/L，pH 6.0。 1 _______________________ 5 中华人民共和国广西地方标准 山风组培苗生产技术规程 DB45/T 1855―2018 广西壮族自治区质量技术监督局统一印刷 版权专有 侵权必究