ICS 67.040 C 53 DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB 34/T 2778—2016 大米中噻呋酰胺残留量的测定 气相色谱法 Determination of thifluzamide residue in rice by GC 文稿版次选择 2016 - 12 - 30 发布 安徽省质量技术监督局 2017 - 01 - 30 实施 发 布 DB34/T 2778—2016 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所提出。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所、农业部农产品质量安全风 险评估实验室（合肥）、安徽省畜牧技术推广总站、池州市农产品质量安全监测中心、安徽科立特农药 环境科技评价有限公司、繁昌县植保站。 本标准起草人：段劲生、高同春、孙明娜、王梅、李瑞、董旭、肖青青、褚玥、许四五、吴爱美、 彭卫兵、朱玉杰、杨通。 I DB34/T 2778—2016 大米中噻呋酰胺残留量的测定 气相色谱法 1 范围 本标准规定了大米中噻呋酰胺残留量的气相色谱测定方法。 本标准适用于大米中噻呋酰胺残留量的测定。 本标准的方法检出限为 0.01 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 5491 粮食、油料检验 扦样、分样法 GB/T 6379.1 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第1部分:总则与定义 GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第2部分:确定标准测量方法重复性与 再现性的基本方法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 大米试样用丙酮和石油醚混合溶液提取后，经弗罗里硅土柱层析净化，用气相色谱 ECD 检测器检 测，外标法定量。 4 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 4.7 4.8 4.9 试剂与材料 水为 GB/T 6682 规定的二级水。以下凡无特殊注明的试剂均为分析纯。 正己烷。 丙酮。 石油醚：60～90℃。 正己烷：色谱纯。 无水硫酸钠：用前在 650℃下灼烧 4 h 后备用，玻璃干燥器中储存。 弗罗里硅土：60～100 目，用前 650℃处理 4 h，加水 5％减活，备用，玻璃干燥器中储存。 噻呋酰胺标准品：纯度≥99％。 标准溶液 ——噻呋酰胺标准储备液：准确称取噻呋酰胺 0.0100 g，置于 10.0 mL 容量瓶中，丙酮溶解并定 容至刻度，配置成浓度为 1000 mg/L 储备液，于 0～5℃下避光保存，有效期一年。 ——噻呋酰胺标准工作液：取 1000μg/mL 噻呋酰胺储备液，用正己烷稀释，配成质量浓度分别为 10.0 mg/L、5.0 mg/L、1.0 mg/L、0.5 mg/L、0.1 mg/L、0.05 mg/L 和 0.01 mg/L 的标准工 作溶液，待用。 1 DB34/T 2778—2016 ——标准工作液需现配现用。 5 主要仪器和设备 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.6 6 气相色谱仪：配 ECD 检测器。 旋转蒸发仪。 真空泵。 水浴恒温振荡器。 氮吹仪 电子天平：感量 0.1 g 和 0.1 mg。 分析步骤 6.1 试样的制备与贮藏 按照 GB 5491 的规定将不少于 1000 g 大米（已脱壳）混匀，四分法取样，放入食品加工机粉碎， 过 20 目筛，制成试样，放入试样瓶中密封，做上标记，并置于 -20℃条件下保存，待测。 6.2 试样处理 6.2.1 提取 准确称取 20 g（精确至 0.1 g）制备好的试样于具塞三角瓶中，向具塞三角瓶中加 100 mL 丙酮 （4.2）和石油醚（4.3）混合溶液（1+1，体积比），室温下水浴振荡提取 1 h，经无水硫酸钠（4.5） 过滤，残渣用 20 mL 丙酮（4.2）和石油醚（4.3）混合溶液（1+1，体积比）洗涤，合并滤液于浓缩瓶 中，用旋转蒸发仪于 40℃水浴下浓缩至近干，5 mL 石油醚定容，待柱层析净化。 6.2.2 净化 在玻璃层析柱中依次装填 2.0 cm 高无水硫酸钠、4.0 g 弗罗里硅土（4.6）、2.0 cm 高无水硫酸 钠，，层析柱先用 10 mL 石油醚预淋洗，弃去，然后转移样品液至柱上，用 20 mL 石油醚+丙酮（98+2， 体积比）淋洗液，分 2 至 3 次洗涤样品瓶，转移到柱上再弃去流出液，最后用 20 mL 丙酮洗脱，收 集洗脱液，用旋转蒸发仪于 40℃水浴下浓缩至近干，氮吹仪用氮气吹干，正己烷（4.4）定容至 5.0 mL， 供气相色谱仪测定。 6.3 测定 6.3.1 气相色谱条件 6.3.1.1 6.3.1.2 6.3.1.3 6.3.1.4 6.3.1.5 6.3.1.6 色谱柱：HP-5, 2.65μm，10 m×0.53 mm（内径）或相当者； 柱箱温度（程序升温）：110℃ 20℃/min 220℃ 2℃/min 240℃ 20℃/min 270℃ （5 min）； 进样口温度：250℃； 检测器温度：300℃； 载气：高纯氮，流速 10 mL/min； 进样量：1μL. 6.3.2 气相色谱测定 2 DB34/T 2778—2016 取噻呋酰胺标准工作溶液系列（4.8.2）及试样溶液各 1 μL，注入气相色谱仪进行分析，用外标 法定量。 6.4 平行试验 按以上步骤，对同一试样进行平行测定。 6.5 空白实验 除不称取试样外，均按上述步骤测定。 7 结果计算 试样中的噻呋酰胺含量按公式（1）计算： R C V m .................................... (1) 式中： R —— C —— V —— m —— 样品中噻呋酰胺残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 从标准曲线上得到的待测样液中噻呋酰胺的浓度，单位为毫克每升（mg/L)； 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； 称取的试样量，单位为克（g）。 注：计算结果应扣除空白值。 8 方法的准确度和精密度 8.1 准确度 本方法在 0.01 mg/kg～5.0 mg/kg 之间添加浓度的回收率在 80％～110％之间。 8.2 精密度 本标准精密度数据是按照 GB/T 6379.1 和 GB/T 6379.2 的规定确定的，获得重复性和再现性的值 是以 95％的可信度来计算，本标准方法的精密度数据参照附录A。 9 气相色谱参考图 见附录B。 3 DB34/T 2778—2016 AA 附 录 A （资料性附录） 噻呋酰胺精密度数据表 表A.1 噻呋酰胺精密度数据表 名称 噻呋酰胺 4 含量 （mg/kg） 0.01 重复性限 r 再现性限 R 0.07504 0.0016 含量 （mg/kg） 0.5 重复性限 r 再现性限 R 0.04368 0.0380 DB34/T 2778—2016 BB 附 录 B （资料性附录） 标准溶液色谱图 ECD2 A, 前部信号 (噻呋酰胺\噻呋酰胺 2013-09-18 10-20-20\101F0101.D) 10.536 Hz 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5 20 min 图B.1 噻呋酰胺标准溶液色谱图（1.0 mg/L） _________________________________ 5